抗原表位特異性的測(cè)定

在研究免疫原性時(shí)，ADAs的抗原表位特異性的測(cè)定十分 重要。根據(jù)FDA的建議（1）,申請(qǐng)人應(yīng)該研究在抗原上 的哪些區(qū)域產(chǎn)生了免疫應(yīng)答：“FDA建議申請(qǐng)人直接針 對(duì)完整分子和內(nèi)源對(duì)應(yīng)物進(jìn)行初步篩選試驗(yàn)。然而，對(duì) 于產(chǎn)品幵發(fā)，申請(qǐng)人應(yīng)該研究導(dǎo)致免疫響應(yīng)產(chǎn)生的特異 抗原區(qū)域或“抗原表位”。這種測(cè)定方法對(duì)于融合分子 可能尤為重要，因?yàn)閮蓚€(gè)蛋白是通過(guò)基因或物理手段被 “融合”在一起的?？梢栽诤Y選階段就利用Biacore系統(tǒng) 進(jìn)行抗原表位特異性的測(cè)定。一個(gè)便捷的方法就是固定 全長(zhǎng)的藥物在一個(gè)流動(dòng)池（Flow cell）中，同時(shí)固定藥 物的不同結(jié)構(gòu)域在其他流動(dòng)池中。

交叉反應(yīng)也可以采用相同的模式進(jìn)行測(cè)定，但是在每個(gè) 流動(dòng)池中固定不同的藥物。為了評(píng)估抗darbepoetin alfa 抗體是否存在潛在的對(duì)epoetin alfa的交叉反應(yīng)，Mytych 等幵發(fā)了一種基于Biacore的雙流動(dòng)池生物傳感器免疫檢 測(cè)法，其中含有一個(gè)固定有epoetin alfa通道（3）。這 種免疫檢測(cè)法被Amgen公司作為首選方法，用于檢測(cè)和 表征人血清中的抗epoetinalfa和抗darbepoetin alfa抗體。